Mafuta safi ya Saposhnikovia divaricata kwa mishumaa na sabuni kutengeneza mafuta muhimu ya kusambaza mafuta mapya kwa vichomea mianzi.

Mafuta safi ya Saposhnikovia divaricata kwa ajili ya mishumaa na sabuni kutengeneza mafuta muhimu ya kusambaza mafuta mapya kwa vichomea mianzi Picha Iliyoangaziwa

maelezo mafupi:

2.1. Maandalizi ya SDE

Mizizi ya SD ilinunuliwa kama mimea iliyokaushwa kutoka Hanherb Co. (Guri, Korea). Nyenzo za mmea zilithibitishwa kitabia na Dk. Go-Ya Choi wa Taasisi ya Tiba ya Mashariki ya Korea (KIOM). Sampuli ya vocha (nambari ya 2014 SDE-6) iliwekwa katika Herbarium ya Korea ya Standard Herbal Resources. Rhizomes zilizokaushwa za SD (320 g) zilitolewa mara mbili na 70% ya ethanol (pamoja na reflux ya 2 h) na dondoo liliwekwa chini ya shinikizo lililopunguzwa. Mchuzi ulichujwa, lyophilized, na kuhifadhiwa kwa 4 ° C. Mavuno ya dondoo kavu kutoka kwa nyenzo ghafi ya kuanzia ilikuwa 48.13% (w/w).

2.2. Uchambuzi wa Kiasi cha Ufanisi wa Kioevu wa Chromatography (HPLC).

Uchambuzi wa kromatografia ulifanywa kwa mfumo wa HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) na kigunduzi cha safu ya picha. Kwa uchambuzi wa HPLC wa SDE, prim-OKiwango cha -glucosylcimifugin kilinunuliwa kutoka Taasisi ya Ukuzaji ya Korea ya Sekta ya Tiba Asilia (Gyeongsan, Korea), nasekunde-O-glucosylhamaudol na 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol zilitengwa ndani ya maabara yetu na kutambuliwa na uchambuzi wa spectral, hasa na NMR na MS.

Sampuli za SDE (0.1 mg) ziliyeyushwa katika 70% ya ethanol (10 mL). Utenganishaji wa kromatografia ulifanywa kwa safu wima ya XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Awamu ya rununu ilijumuisha asetonitrile (A) na 0.1% ya asidi asetiki katika maji (B) kwa kiwango cha mtiririko wa 1.0 mL/min. Mpango wa gradient wa hatua nyingi ulitumiwa kama ifuatavyo: 5% A (dak 0), 5-20% A (dak 0-10), 20% A (dakika 10-23), na 20-65% A (dakika 23-40 ) Urefu wa urefu wa ugunduzi ulichanganuliwa kwa 210-400 nm na kurekodiwa kwa 254 nm. Kiasi cha sindano kilikuwa 10.0μL. Suluhu za kawaida za kubaini kromoni tatu zilitayarishwa kwa mkusanyiko wa mwisho wa 7.781 mg/mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol), na 31.125 mg/mL (sekunde-O-glucosylhamaudol) katika methanoli na kuhifadhiwa kwa 4°C.

2.3. Tathmini ya Shughuli ya Kupambana na UvimbeKatika Vitro

2.3.1. Utamaduni wa Kiini na Matibabu ya Mfano

Seli MBICHI 264.7 zilipatikana kutoka kwa Mkusanyiko wa Utamaduni wa Aina ya Kimarekani (ATCC, Manassas, VA, USA) na kukuzwa katika kati ya DMEM iliyo na 1% ya viuavijasumu na 5.5% FBS. Seli ziliwekwa katika hali ya unyevu wa 5% CO2 ifikapo 37°C. Ili kuchochea seli, kati ilibadilishwa na DMEM kati safi, na lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) saa 1.μg/mL iliongezwa kuwepo au kutokuwepo kwa SDE (200 au 400μg/mL) kwa saa 24 za ziada.

2.3.2. Uamuzi wa Nitriki Oksidi (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α), na Uzalishaji wa Interleukin-6 (IL-6).

Seli zilitibiwa kwa SDE na kuchochewa na LPS kwa h 24. Uzalishaji NO ulichambuliwa kwa kupima nitriti kwa kutumia kitendanishi cha Griess kulingana na utafiti uliopita [12]. Usiri wa cytokines za uchochezi PGE2, TNF-α, na IL-6 iliamuliwa kwa kutumia ELISA kit (mifumo ya R&D) kulingana na maagizo ya mtengenezaji. Madhara ya SDE kwenye NO na uzalishaji wa cytokine yaliamuliwa kwa 540 nm au 450 nm kwa kutumia Wallac EnVision.™msomaji wa microplate (PerkinElmer).

2.4. Tathmini ya Shughuli ya AntiosteoarthritisKatika Vivo

2.4.1. Wanyama

Panya wa kiume wa Sprague-Dawley (umri wa wiki 7) walinunuliwa kutoka Samtako Inc. (Osan, Korea) na waliwekwa chini ya hali iliyodhibitiwa na mzunguko wa saa 12 wa mwanga/giza.°C na% unyevu. Panya walipewa chakula cha maabara na majiad libitum. Taratibu zote za majaribio zilifanywa kwa kufuata miongozo ya Taasisi za Kitaifa za Afya (NIH) na kuidhinishwa na Kamati ya Utunzaji na Matumizi ya Wanyama ya chuo kikuu cha Daejeon (Daejeon, jamhuri ya Korea).

2.4.2. Uingizaji wa OA na MIA katika Panya

Wanyama waliwekwa nasibu na walipewa vikundi vya matibabu kabla ya kuanzishwa kwa utafiti (kwa kikundi). Suluhisho la MIA (3 mg/50μL ya 0.9% ya chumvi) iliingizwa moja kwa moja kwenye nafasi ya intra-articular ya goti la kulia chini ya anesthesia iliyosababishwa na mchanganyiko wa ketamine na xylazine. Panya waligawanywa nasibu katika vikundi vinne: (1) kikundi cha chumvi bila sindano ya MIA, (2) kikundi cha MIA kilichochomwa sindano ya MIA, (3) kikundi kilichotibiwa na SDE (200 mg/kg) na sindano ya MIA, na (4). ) kikundi cha indomethacin- (IM-) kilichotibiwa (2 mg/kg) kwa sindano ya MIA. Panya zilitolewa kwa mdomo na SDE na IM wiki 1 kabla ya sindano ya MIA kwa wiki 4. Kipimo cha SDE na IM kilichotumika katika utafiti huu kilitokana na wale walioajiriwa katika masomo ya awali [10,13,14].

2.4.3. Vipimo vya Usambazaji Wenye Uzito wa Hindpaw

Baada ya kuingizwa kwa OA, usawa wa awali katika uwezo wa kubeba uzito wa hindpaws ulivunjwa. Kipima uwezo wa kutoweza (Linton instrumentation, Norfolk, UK) kilitumiwa kutathmini mabadiliko katika uvumilivu wa kubeba uzito. Panya waliwekwa kwa uangalifu ndani ya chumba cha kupimia. Nguvu ya kubeba uzani inayotolewa na kiungo cha nyuma ilikuwa wastani katika kipindi cha 3 s. Uwiano wa mgawanyo wa uzito ulikokotolewa kwa mlinganyo ufuatao: [uzito kwenye kiungo cha nyuma cha kulia/(uzito kwenye kiungo cha nyuma cha kulia + uzito kwenye kiungo cha nyuma cha kushoto)] × 100 [15].

2.4.4. Vipimo vya Viwango vya Serum Cytokine

Sampuli za damu ziliwekwa katikati kwa 1,500 g kwa dakika 10 kwa 4 ° C; kisha seramu ilikusanywa na kuhifadhiwa kwa −70°C hadi itumike. Viwango vya IL-1β, IL-6, TNF-α, na PGE2 katika seramu ilipimwa kwa kutumia vifaa vya ELISA kutoka kwa Mifumo ya R&D (Minneapolis, MN, USA) kulingana na maagizo ya mtengenezaji.

2.4.5. Uchambuzi wa Muda Halisi wa RT-PCR

Jumla ya RNA ilitolewa kutoka kwa tishu za pamoja za goti kwa kutumia reagent ya TRI (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), iliyonakiliwa kinyume katika cDNA na PCR-iliyokuzwa kwa kutumia TM One Step RT PCR kit na SYBR kijani (Applied Biosystems , Grand Island, NY, USA). PCR ya muda halisi ilitekelezwa kwa kutumia mfumo wa PCR wa Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Mlolongo wa kwanza na mlolongo wa uchunguzi unaonyeshwa kwenye Jedwali1. Alinukuu za sampuli za cDNA na kiasi sawa cha cDNA ya GAPDH zilikuzwa kwa mchanganyiko mkuu wa TaqMan® Universal PCR ulio na DNA polymerase kulingana na maagizo ya mtengenezaji (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Masharti ya PCR yalikuwa dakika 2 kwa 50 ° C, dakika 10 kwa 94 ° C, 15 s kwa 95 ° C, na dakika 1 kwa 60 ° C kwa mizunguko 40. Mkusanyiko wa jeni inayolengwa iliamuliwa kwa kutumia mbinu ya kulinganisha ya Ct (nambari ya mzunguko wa kizingiti katika sehemu ya kati kati ya eneo la ukuzaji na kizingiti), kulingana na maagizo ya mtengenezaji.

Bei ya FOB:US $0.5 - 9,999 / Kipande

Kiasi kidogo cha Agizo:Vipande 100/Vipande

Uwezo wa Ugavi:10000 Kipande/Vipande kwa Mwezi

Tutumie barua pepe

Maelezo ya Bidhaa

Lebo za Bidhaa

Osteoarthritis (OA) ndio ugonjwa wa mara kwa mara wa musculoskeletal na ugonjwa wa kawaida wa viungo vya kuzorota kwa wazee [1]. OA ni hali inayosababishwa kwa sehemu na jeraha, kupoteza muundo na utendaji wa gegedu, na kuharibika kwa njia za uchochezi na za kuzuia uchochezi [2,3]. Huathiri hasa cartilage ya articular na subchondral bone ya viungo vya synovial na kusababisha kushindwa kwa viungo, na kusababisha maumivu wakati wa kubeba uzito ikiwa ni pamoja na kutembea na kusimama [4].

Hakuna tiba ya OA, kwani ni vigumu sana kurejesha gegedu mara inapoharibiwa [5]. Malengo ya matibabu ni kupunguza maumivu, kudumisha au kuboresha uhamaji wa viungo, kuongeza nguvu ya viungo, na kupunguza athari za ugonjwa. Matibabu ya kifamasia ya OA yanalenga kupunguza maumivu ili kuongeza utendaji wa viungo vya mgonjwa na ubora wa maisha. Ingawa uharibifu wa cartilage ndilo tukio kuu katika OA, uharibifu wa collagen ni tukio la msingi ambalo huamua kuendelea kwa OA kwa kushirikiana na kuvimba [6,7]. Matibabu na shughuli za kupambana na uchochezi na chondroprotective zinatarajiwa kupunguza maumivu na kudumisha uadilifu wa tumbo kwa wagonjwa wa OA.

Kwa hivyo, kupungua kwa uvimbe kunaweza kuwa na manufaa katika usimamizi wa OA. Uchunguzi wa hivi karibuni unaonyesha jukumu la ulinzi kwa rasilimali za mitishamba juu ya maendeleo ya OA, katika suala la kupunguza uvimbe wa chondrocyte na uharibifu zaidi wa cartilage, kupitia uwezo wao wa kuingiliana na tishu zinazohusiana na pamoja, na kusababisha kupunguza maumivu ya pamoja.8].

Mzizi waSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) imekuwa ikitumiwa sana katika dawa za jadi kwa ajili ya kutibu maumivu ya kichwa, maumivu, uvimbe, na ugonjwa wa yabisi-kavu nchini Korea na China [9,10]. Athari tofauti za kifamasiaSaposhnikovia divaricata(SD) pia ni pamoja na kupambana na uchochezi, analgesic, antipyretic, na antiarthritic mali [9,11]. Utafiti wa hivi majuzi ulionyesha kuwa dondoo ya chromone ya SD ina athari zinazowezekana za ugonjwa wa arheumatoid katika mfano wa panya wa ugonjwa wa yabisi unaosababishwa na kolajeni [10]; hata hivyo, tafiti chache zimefanywa ili kusaidia shughuli ya kupambana na uchochezi na antiarthritis yaSaposhnikovia divaricatadondoo (SDE).

Kwa hiyo, utafiti wa sasa ulichunguza shughuli za kupambana na uchochezi na antiosteoarthritis ya dondoo ya 70% ya ethanol ya SD. Kwanza, athari ya kupambana na uchochezi ya SDE ilitathminiwakatika vitrokatika seli za RAW 264.7 zinazotokana na LPS. Kisha, athari ya antiosteoarthritis ya SDE ilipimwa kwa kutathmini usambazaji wa kubeba uzito, uharibifu wa cartilage ya articular, na majibu ya uchochezi katika mfano wa panya wa monosodiamu iodoacetate- (MIA-) iliyosababishwa OA.