Osteoarthritis (OA) ni mojawapo ya magonjwa sugu ya muda mrefu ya viungo vya mifupa ambayo huathiri watu wazee zaidi ya miaka 65 [
1Kwa ujumla, wagonjwa wa OA hugunduliwa na gegedu iliyoharibika, sinoviamu iliyovimba, na kondrositi zilizomomonyoka, ambazo husababisha maumivu na msongo wa kimwili [
2Maumivu ya arthritis husababishwa zaidi na kuzorota kwa gegedu kwenye viungo kutokana na uvimbe, na gegedu inapoharibika sana mifupa inaweza kugongana na kusababisha maumivu yasiyovumilika na ugumu wa kimwili [
3]. Kuhusika kwa wapatanishi wa uchochezi wenye dalili kama vile maumivu, uvimbe, na ugumu wa kiungo kumerekodiwa vyema. Kwa wagonjwa wa OA, saitokini za uchochezi, ambazo husababisha mmomonyoko wa gegedu na mfupa wa subchondral hupatikana kwenye umajimaji wa sinovia [
4]. Malalamiko mawili makubwa ambayo wagonjwa wa OA kwa ujumla wanayo ni maumivu na uvimbe wa sinovia. Kwa hivyo malengo makuu ya matibabu ya sasa ya OA ni kupunguza maumivu na uvimbe.
5Ingawa matibabu ya OA yanayopatikana, ikiwa ni pamoja na dawa zisizo za steroidal na steroidal, yamethibitika kuwa na ufanisi katika kupunguza maumivu na uvimbe, matumizi ya muda mrefu ya dawa hizi yana madhara makubwa kiafya kama vile matatizo ya moyo na mishipa, utumbo, na figo [
6Kwa hivyo, dawa yenye ufanisi zaidi yenye madhara machache inapaswa kutengenezwa kwa ajili ya matibabu ya ugonjwa wa mifupa.
Bidhaa asilia za afya zinazidi kuwa maarufu kwa kuwa salama na zinapatikana kwa urahisi [
7Dawa za kitamaduni za Kikorea zimethibitisha ufanisi dhidi ya magonjwa kadhaa ya uchochezi, ikiwa ni pamoja na yabisi-kavu [
8Aucklandia lappa DC. inajulikana kwa sifa zake za kimatibabu, kama vile kuongeza mzunguko wa damu wa qi kwa ajili ya kupunguza maumivu na kutuliza tumbo, na imekuwa ikitumika kijadi kama dawa ya asili ya kutuliza maumivu [
9Ripoti za awali zinaonyesha kwamba A. lappa ina dawa ya kuzuia uvimbe [
10,
11], dawa ya kutuliza maumivu [
12], dawa za saratani [
13], na kinga ya utumbo [
14] athari. Shughuli mbalimbali za kibiolojia za A. lappa husababishwa na misombo yake mikuu inayofanya kazi: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone na costuslactone [
15]. Tafiti za awali zinadai kwamba costunolide ilionyesha sifa za kuzuia uvimbe katika lipopolysaccharide (LPS), ambayo ilisababisha makrofaji kupitia udhibiti wa NF-kB na njia ya protini ya mshtuko wa joto [
16,
17Hata hivyo, hakuna utafiti uliochunguza shughuli zinazowezekana za A. lappa kwa matibabu ya OA. Utafiti huu umechunguza athari za matibabu za A. lappa dhidi ya OA kwa kutumia (monosodium-iodoacetate) MIA na mifano ya panya inayosababishwa na asidi asetiki.
Monosodium-iodoacetate (MIA) hutumika sana kusababisha tabia nyingi za maumivu na sifa za kiitolojia za OA kwa wanyama [
18,
19,
20]. Inapodungwa kwenye viungo vya goti, MIA huharibu umetaboli wa kondrositi na kusababisha dalili za uvimbe na uchochezi, kama vile mmomonyoko wa gegedu na mfupa wa subchondral, dalili kuu za OA [
18]. Mwitikio wa mikunjo unaosababishwa na asidi asetiki unachukuliwa sana kama uigaji wa maumivu ya pembeni kwa wanyama ambapo maumivu ya uchochezi yanaweza kupimwa kwa kiasi [
19]. Mstari wa seli ya makrofaji ya panya, RAW264.7, hutumika sana kusoma majibu ya seli kwa uvimbe. Baada ya kuamilishwa na LPS, makrofaji ya RAW264 huamsha njia za uchochezi na kutoa viunganishi kadhaa vya uchochezi, kama vile TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, na IL-6 [
20Utafiti huu umetathmini athari za kuzuia noksika na uchochezi za A. lappa dhidi ya OA katika mfumo wa wanyama wa MIA, mfumo wa wanyama unaosababishwa na asidi asetiki, na seli za RAW264.7 zilizoamilishwa na LPS.
2. Nyenzo na Mbinu
2.1. Nyenzo za Mimea
Mzizi mkavu wa A. lappa DC. uliotumika katika jaribio ulipatikana kutoka Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). Ulitambuliwa na Profesa Donghun Lee, Idara ya Famasia ya Mimea, Kanali wa Tiba ya Korea, Chuo Kikuu cha Gachon, na nambari ya sampuli ya vocha iliwekwa kama 18060301.
2.2. Uchambuzi wa HPLC wa Dondoo ya A. lappa
A. lappa ilitolewa kwa kutumia kifaa cha reflux (maji yaliyoyeyushwa, saa 3 kwa 100 °C). Myeyusho uliotolewa ulichujwa na kuganda kwa kutumia kivukizi chenye shinikizo la chini. Dondoo la A. lappa lilikuwa na mavuno ya 44.69% baada ya kukausha kwa kugandisha chini ya −80 °C. Uchambuzi wa kromatografia wa A. lappa ulifanywa kwa kutumia HPLC iliyounganishwa kwa kutumia mfumo wa 1260 InfinityⅡ HPLC (Agilent, Pal Alto, CA, Marekani). Kwa utenganisho wa kromatiki, safu wima ya EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ilitumika kwa 35 °C. Jumla ya 100 mg ya sampuli ilipunguzwa katika 10 mL ya 50% methanoli na kuchanganywa kwa dakika 10. Sampuli zilichujwa kwa kutumia kichujio cha sindano (Waters Corp., Milford, MA, Marekani) cha 0.45 μm. Muundo wa awamu inayotembea ulikuwa 0.1% ya asidi fosforasi (A) na asetonitrile (B) na safu iliondolewa kama ifuatavyo: dakika 0–60, 0%; dakika 60–65, 100%; dakika 65–67, 100%; dakika 67–72, 0% ya kiyeyusho B na kiwango cha mtiririko cha 1.0 mL/dakika. Mtiririko wa maji machafu ulionekana katika 210 nm kwa kutumia ujazo wa sindano wa 10 μL. Uchambuzi ulifanywa kwa nakala tatu.
2.3. Makazi na Usimamizi wa Wanyama
Panya dume wa Sprague–Dawley (SD) wenye umri wa wiki 5 na panya dume wa ICR wenye umri wa wiki 6 walinunuliwa kutoka Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Wanyama waliwekwa kwenye chumba kwa kutumia halijoto isiyobadilika (22 ± 2 °C) na unyevunyevu (55 ± 10%) na mzunguko wa mwanga/giza wa saa 12/12. Wanyama walifahamu hali hiyo kwa zaidi ya wiki moja kabla ya jaribio kuanza. Wanyama walikuwa na usambazaji wa chakula na maji bila malipo. Sheria za sasa za maadili za utunzaji na utunzaji wa wanyama katika Chuo Kikuu cha Gachon (GIACUC-R2019003) zilifuatwa kwa ukali katika taratibu zote za majaribio ya wanyama. Utafiti huo ulibuniwa kwa majaribio ya uchunguzi na sambamba. Tulifuata mbinu ya euthanasia kulingana na miongozo ya Kamati ya Maadili ya Majaribio ya Wanyama.
2.4. Sindano na Matibabu ya MIA
Panya waligawanywa bila mpangilio katika makundi 4, yaani sham, control, indomethacin, na A. lappa. Wakiwa wamepewa ganzi kwa mchanganyiko wa 2% isofluorane O2, panya walidungwa sindano kwa kutumia 50 μL ya MIA (40 mg/m2; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Marekani) ndani ya viungo vya goti ili kusababisha OA ya majaribio. Matibabu yalifanywa kama ifuatavyo: makundi ya udhibiti na sham yalidumishwa tu kwa lishe ya msingi ya AIN-93G. Ni kundi la indomethacin pekee lililopewa indomethacin (3 mg/kg) iliyojumuishwa katika lishe ya AIN-93G na kundi la A. lappa 300 mg/kg liliwekwa kwenye lishe ya AIN-93G iliyoongezewa A. lappa (300 mg/kg). Matibabu yaliendelea kwa siku 24 tangu siku ya uanzishaji wa OA kwa kiwango cha 15-17 g kwa kila uzito wa mwili wa 190-210 g kila siku.
2.5. Kipimo cha Kubeba Uzito
Baada ya uanzishaji wa OA, kipimo cha uwezo wa kubeba uzito wa viungo vya nyuma vya panya kilifanyika kwa kutumia kipimo cha kutoweza kufanya kazi-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, Marekani) kama ilivyopangwa. Usambazaji wa uzito kwenye viungo vya nyuma ulihesabiwa: uwezo wa kubeba uzito (%)
