Osteoarthritis (OA) ni mojawapo ya magonjwa sugu ya muda mrefu ya mifupa ambayo huathiri watu wazee zaidi ya 65 [
1]. Kwa ujumla, wagonjwa wa OA hugunduliwa kuwa na cartilage iliyoharibiwa, synovium iliyowaka, na chondrocyte zilizoharibika, ambazo husababisha maumivu na shida ya kimwili [
2]. Maumivu ya Arthritis husababishwa zaidi na kuzorota kwa gegedu kwenye viungo kwa sababu ya kuvimba, na gegedu inapoharibika sana mifupa inaweza kugongana na kusababisha maumivu yasiyovumilika na matatizo ya kimwili [
3]. Ushiriki wa wapatanishi wa uchochezi wenye dalili kama vile maumivu, uvimbe, na ugumu wa kiungo ni kumbukumbu vizuri. Kwa wagonjwa wa OA, cytokines za uchochezi, ambazo husababisha mmomonyoko wa cartilage na mfupa wa subchondral hupatikana katika maji ya synovial.
4]. Malalamiko mawili makuu ambayo wagonjwa wa OA huwa nayo kwa ujumla ni maumivu na uvimbe wa synovial. Kwa hiyo malengo ya msingi ya matibabu ya sasa ya OA ni kupunguza maumivu na uvimbe. [
5]. Ingawa matibabu yanayopatikana ya OA, pamoja na dawa zisizo za steroidal na steroidal, yamethibitisha ufanisi katika kupunguza maumivu na uvimbe, matumizi ya muda mrefu ya dawa hizi yana madhara makubwa kiafya kama vile ugonjwa wa moyo na mishipa, utumbo na figo.
6]. Kwa hivyo, dawa yenye ufanisi zaidi na madhara machache inapaswa kutengenezwa kwa ajili ya matibabu ya osteoarthritis.
Bidhaa asilia za afya zinazidi kuwa maarufu kwa kuwa salama na zinapatikana kwa urahisi [
7]. Dawa za jadi za Kikorea zimethibitisha ufanisi dhidi ya magonjwa kadhaa ya uchochezi, ikiwa ni pamoja na arthritis [
8]. Aucklandia lappa DC. inajulikana kwa sifa zake za kitabibu, kama vile kuimarisha mzunguko wa qi kwa ajili ya kutuliza maumivu na kutuliza tumbo, na imekuwa ikitumika jadi kama dawa ya kutuliza maumivu [
9]. Ripoti za awali zinaonyesha kuwa A. lappa ana dawa za kuzuia uchochezi [
10,
11], dawa ya kutuliza maumivu [
12], anticancer [
13], na kinga ya utumbo [
14] athari. Shughuli mbalimbali za kibiolojia za A. lappa husababishwa na misombo yake kuu inayofanya kazi: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea laktoni na costuslactone [
15]. Uchunguzi wa hapo awali unadai kuwa costunolide ilionyesha mali ya kuzuia uchochezi katika lipopolysaccharide (LPS), ambayo ilisababisha macrophages kupitia udhibiti wa NF-kB na njia ya protini ya mshtuko wa joto.
16,
17]. Hata hivyo, hakuna utafiti ambao umechunguza shughuli zinazowezekana za A. lappa kwa matibabu ya OA. Utafiti wa sasa umechunguza athari za matibabu za A. lappa dhidi ya OA kwa kutumia (monosodium-iodoacetate) MIA na modeli za panya zinazotokana na asidi asetiki.
Monosodiamu-iodoacetate (MIA) hutumiwa sana kuzalisha tabia nyingi za maumivu na sifa za kiafya za OA katika wanyama [
18,
19,
20]. Inapodungwa kwenye viungo vya goti, MIA huvuruga kimetaboliki ya chondrocyte na kusababisha uvimbe na dalili za uchochezi, kama vile cartilage na mmomonyoko wa mifupa ya subchondral, dalili kuu za OA [
18]. Mwitikio wa kuandika unaosababishwa na asidi asetiki unachukuliwa sana kama simulizi ya maumivu ya pembeni kwa wanyama ambapo maumivu ya uchochezi yanaweza kupimwa kwa kiasi kikubwa [
19]. Laini ya seli ya macrophage ya panya, RAW264.7, inatumika sana kusoma majibu ya seli kwa uchochezi. Baada ya kuanzishwa kwa LPS, RAW264 macrophages huwasha njia za uchochezi na kutoa waamuzi kadhaa wa uchochezi, kama vile TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, na IL-6 [
20]. Utafiti huu umetathmini madhara ya kupambana na nociceptive na kupambana na uchochezi wa A. lappa dhidi ya OA katika mfano wa wanyama wa MIA, mfano wa wanyama unaosababishwa na asidi ya asetiki, na seli za RAW264.7 zilizoamilishwa na LPS.
2. Nyenzo na Mbinu
2.1. Nyenzo za Kupanda
Mzizi mkavu wa A. lappa DC. iliyotumika katika jaribio ilinunuliwa kutoka kwa Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). Ilitambuliwa na Prof. Donghun Lee, Idara ya Dawa ya Mimea, Kanali wa Tiba ya Korea, Chuo Kikuu cha Gachon, na nambari ya sampuli ya vocha iliwekwa kama 18060301.
2.2. Uchambuzi wa HPLC wa Dondoo ya A. lappa
A. lappa ilitolewa kwa kutumia kifaa cha reflux (maji yaliyochujwa, saa 3 kwa 100 °C). Suluhisho lililotolewa lilichujwa na kufupishwa kwa kutumia evaporator ya shinikizo la chini. Dondoo la A. lappa lilikuwa na mavuno ya 44.69% baada ya kukausha kwa kugandisha chini ya −80 °C. Uchambuzi wa kromatografia wa A. lappa ulifanywa kwa HPLC iliyounganishwa kwa kutumia mfumo wa 1260 InfinityⅡ HPLC (Agilent, Pal Alto, CA, USA). Kwa utenganisho wa kromati, safu wima ya EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ilitumika kwa 35 °C. jumla ya mg 100 ya specimen alikuwa diluted katika 10 ya mililita ya 50% methanol na sonicated kwa 10 min. Sampuli zilichujwa kwa chujio cha sindano (Waters Corp., Milford, MA, USA) cha 0.45 μm. Muundo wa awamu ya rununu ulikuwa 0.1% ya asidi ya fosforasi (A) na asetonitrile (B) na safu wima ilitolewa kama ifuatavyo: dk 0-60, 0%; Dakika 60-65, 100%; Dakika 65-67, 100%; Dakika 67-72, 0% kutengenezea B na kiwango cha mtiririko wa 1.0 mL / min. Maji taka yalizingatiwa kwa nm 210 kwa kutumia ujazo wa sindano wa 10 μL. Uchambuzi ulifanyika katika nakala tatu.
2.3. Makazi na Usimamizi wa Wanyama
Panya wa kiume wa Sprague–Dawley (SD) wenye umri wa wiki 5 na panya wa kiume wa ICR wenye umri wa wiki 6 walinunuliwa kutoka Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Wanyama waliwekwa kwenye chumba kwa kutumia halijoto isiyobadilika (22 ± 2 °C) na unyevunyevu (55 ± 10%) na mzunguko wa mwanga/giza wa 12/12 h. Wanyama hao walifahamu hali hiyo kwa zaidi ya wiki moja kabla ya jaribio kuanza. Wanyama walikuwa na ad libitum ugavi wa malisho na maji. Sheria za sasa za kimaadili za utunzaji na utunzaji wa wanyama katika Chuo Kikuu cha Gachon (GIACUC-R2019003) zilifuatwa kikamilifu katika taratibu zote za majaribio ya wanyama. Utafiti ulibuniwa kama jaribio lililopofushwa na mchunguzi na sambamba. Tulifuata mbinu ya euthanasia kulingana na miongozo ya Kamati ya Maadili ya Majaribio ya Wanyama.
2.4. Sindano ya MIA na Matibabu
Panya waligawanywa nasibu katika vikundi 4, yaani sham, control, indomethacin, na A. lappa. Wakiwa wametiwa ganzi na mchanganyiko wa 2% wa isofluorane O2, panya hao walidungwa kwa kutumia 50 μL ya MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ndani ya viungo vya goti ili kusababisha OA ya majaribio. Matibabu yalifanyika kama hapa chini: vikundi vya udhibiti na uwongo vilidumishwa tu na lishe ya msingi ya AIN-93G. Kikundi cha indomethacin pekee ndicho kilipewa indomethacin (3 mg/kg) iliyojumuishwa katika lishe ya AIN-93G na kikundi cha A. lappa cha 300 mg/kg kiliwekwa kwa lishe ya AIN-93G iliyoongezewa A. lappa (300 mg/kg). Matibabu yaliendelea kwa siku 24 tangu siku ya kuanzishwa kwa OA kwa kiwango cha 15-17 g kwa 190-210 g uzito wa mwili kila siku.
2.5. Kipimo cha Uzito
Baada ya kuingizwa kwa OA, kipimo cha uwezo wa kubeba uzito wa miguu ya nyuma ya panya kilifanywa kwa kutoweza-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) kama ilivyopangwa. Mgawanyo wa uzito kwenye miguu ya nyuma ulikokotolewa: uwezo wa kubeba uzito (%)
